生物等效性試驗中受試者例數的確定（全）
發稿時間：2017-01-25 來源： 培優創新論壇
問：在仿制藥一致性評價生物等效性試驗中，如何計算樣本量或受試者的例數？
答：對于這個問題，首先要分清楚仿制藥本身是普通口服固體藥物、高變異度的藥物還是窄治療指數的藥物。不同類別的藥物計算方法略有不同。
普通口服固體藥物
1.例數要滿足統計學要求，其次要符合法規要求。
2016年國家食品藥品監管總局（CFDA）《以藥動學參數為終點評價指標的化學藥物仿制藥人體生物等效性研究技術指導原則》要求：入選受試者的例數應使生物等效性評價具有足夠的統計學效力。2015年《藥物制劑人體生物利用度和生物等效性試驗指導原則》中指出，應該根據適當的樣本量計算法，確定包括在試驗中的受試者數目。在一項生物等效性試驗中，可評價的受試者數目不應少于18 名。
2.計算方法有查表法、公式法和軟件法，所得結果基本一致，但需要注明計算公式、表格出處或用的是哪種軟件。
公式法：在顯著性水平α達到（1-β）把握度所需的受試者例數計算公式如圖1，n為每個序列受試者的例數；兩周期交叉試驗所需總受試者例數N=2n；CV為個體內變異系數。
查表法：在α=0.05，相同的CV時，要達到較高的把握度，所需要的受試者的例數越多，因此要達到80%和90%的把握度，所需受試者例數N也有區別（見表1）：
軟件法：PASS、nQuery、S+和SAS等軟件都可以計算生物等效性試驗的樣本量。
樣本含量估計以藥代動力學參數的變異系數為計算指標，α=0.05，1-β=0.8，等效標準為80.00%~125.00% ，雙交叉設計試驗的計算過程如圖2。
軟件法和查表法的比較：從表2中可以看出，當變異系數相等，α=0.05，把握度為80%時，軟件法和查表法計算結果基本一致。
高變異性藥物
高變異性藥物是指藥動學參數個體內變異大于等于30%的藥品。
對于高變異藥物生物等效性試驗，可采用參比制劑校正的平均生物等效性（RSABE）方法，該方法可根據參比制劑的個體內變異性對等效限的判定范圍進行比例化的調整。
不同的國家法規在藥代動力學參數(Cmax,AUC) 90%CI的等效性判定標準方面略有差異。CFDA的指導原則明確指出：對于高變異藥物，可根據參比制劑的個體內變異，將等效性評價標準作適當比例的調整，但調整應有充分的依據。如果認為Cmax差異較大，對于臨床的影響不大，基于臨床的充分理由，則可以放寬接受范圍。在這種情況下，Cmax的接受范圍可以最寬為69.84%~143.19%， AUC的接受限保持在80.00%~125.00%。
若采用RSABE方法對等效限范圍進行放寬，要求對參比制劑重復設計，包括部分重復和完全重復設計，或可采用不放寬等效限范圍、僅增加受試者例數的方法。
在計算樣本量前，需要獲得個體內變異。參比制劑的個體內變異系數可通過以下幾種方法獲得：查閱公開數據報道；進行一個小規模預試驗，獲得該藥物準確可靠的個體內變異，然后根據該數據進行受試者例數的估算。
窄治療指數藥物
窄治療指數藥物是指劑量或血藥濃度的微小變化可能導致嚴重的治療失敗和/或嚴重的不良反應，危及生命或引起持續或明顯的殘疾或功能不全的藥物。2015年《藥物制劑人體生物利用度和生物等效性試驗指導原則》中指出：對于治療指數窄的藥品的特殊情況，AUC 的可接受區間應該被縮窄為90.00%~111.11%。在Cmax對安全性、藥效或藥物濃度監測特別重要的情況，該參數也應適用90.00%~111.11%的接受限。因此在計算該類藥物的受試者例數時，要注意等效范圍的改變。
在計算生物等效性受試者的例數時，還需注意以下幾點：計算受試者例數采用的CV是參比制劑的個體內變異CV；對于高變異藥物、窄治療指數藥物進行生物等效性研究時，如果采用RSABE方法，對等效限進行放寬的，建議采用EMA的標準設計方案；如果采用RSABE方法，研究設計必須重復交叉設計試驗，FDA推薦RSABE研究不少于24例。
（本文轉載自培優創新論壇）